1. Introduktion
Kalium 4-metoxisalicylat (4MSK), med en struktur som liknar salicylsyra, är en ny medicinsk blekningsingrediens som används i kosmetika för sin blekande effekt och är en effektiv ingrediens i kosmetika. Den har förmågan att förbättra hudtonsbalansen, lindra överdriven pigmentering, korrigera atypisk proliferation av epidermis, främja utsöndring av melanin och förhindra fräknar och fläckar.

2. Huvudfunktioner
Pigmentering, fräknar och otydlighet är ett problem för många asiatiska kvinnor och därför är hudblekande produkter av stort intresse för asiatiska kvinnor. Effekten av kalium 4-metoxisalicylat har studerats av ledande kosmetikaföretag och resultaten visas nedan.
2.1. Hämning av melanogenes
Musmelanomceller (B16) odlades i tre dagar i närvaro och frånvaro av 4MSK, och antalet celler och mängden melanin som producerades vid ett givet antal celler mättes. Förhållandet mellan antalet celler och mängden melanin i närvaro av 4MSK och mängden melanin i frånvaro av 4MSK erhölls och effekten av 4MSK på melanogenes analyserades på detta sätt.
Resultaten visar att antalet celler och mängden melanin efter 3 dagars tillsats av 4MSK visas i figur 2. Det bekräftades att 4MSK hade en koncentrationsberoende hämmande effekt på melanogenesen, och resultaten från Williams-testet visade sig vara vara statistiskt signifikant för 3 x 10-4 och 10-3 mol/L additionskluster jämfört med frånvaron av 4MSK addition. Emellertid hittades ingen effekt på cellproliferation för någon av de testade koncentrationerna av 4MSK.

2.2. Impedans av kuraminidasaktivitet
För utvärdering av tyrosinasaktivitet i icke-cellulära system var substratet L-DOPA och mängden dopakromproduktion som resulterade från dess metabolism analyserades med ett 475 nm absorbanstest.
Impedanshastigheten för tyrosinasaktivitet av 4MSK bestämdes genom att tillsätta 4MSK-lösning och lysat till ovanstående reaktionssystem och låta denna blandning reagera i 90 sekunder vid rumstemperatur, vilket gav ett förhållande mellan värdena som testades när 4MSK-lösning tillsattes jämfört med lysatgrupp.

2.3. Hämning av UV-inducerade effekter på keratinocytdifferentiering
Omedelbart efter bestrålning av 3D-hudmodellen med UV-ljus tillsattes en 4MSK-lösning till ytan av hudmodellen, inkuberades i 30 minuter och sedan avlägsnades 4MSK och inkuberades under 1 dag. 4MSK-lösningen ersattes av ett lysmedium för kontrolländamål. Hudmodeller som provades efter inkubation färgades med anti-tropinantikroppar för immunhistokemiska studier och omedelbar RT-PCR (omvänd transkription-polymeraskedjereaktion) för kvantifiering av tropin-mRNA-uttryck.
Som ett resultat av immunhistokemiska studier med anti-trofoblastantikroppar liknade den tredimensionella hudmodellen in vivo-testet, med närvaron av ett trofoblastprotein, en differentieringsmarkör, i närheten av det granulära lagret. Efter en dags inkubation av denna hudmodell i UV-brunnar minskade uttrycket av troponin. Tillsatsen av 4MSK till hudmodellen omedelbart efter UV-bestrålning undertryckte signifikant den UV-inducerade minskningen av troponinuttryck.
Vidare visade kvantitativ PCR-analys av RNA extraherat från samma hudmodell att minskningen i mRNA-uttryck av taurolithionein i den UV-bestrålade gruppen undertrycktes i den 4MSK-tillsatta gruppen. Resultaten bekräftade av immunhistokemiska studier, dvs minskningen av troponin-uttryck på proteinnivå och undertryckande av minskningen av 4MSK-uttryck, bekräftades också på mRNA-nivå.

2.4 Mänsklig pigmenteringsförsvarseffekt
Tolv friska vuxna frivilliga män exponerades för UVA- och UVB-våglängder på 4 ställen på buken under 3 dagar med användning av en artificiell UV-ljuskälla med motsvarande lMED (minimal erytemdos) en gång om dagen för varje testperson. Fyra krämer, 1 procent, 3 procent, 5 procent 4MSK och en baskräm användes som testprover och applicerades 3 gånger om dagen i 7 dagar från början av UV-exponeringen. För att utvärdera graden av hyperpigmentering mättes hudtonen före och efter applicering två gånger med en färgtestare och medelvärde för att erhålla mängden förändring före och efter exponering, jämförde de områden där de olika koncentrationerna av 4MSK-krämer applicerades med de områden där baskrämerna applicerades.
Alla 12 manliga försökspersoner användes som försökspersoner. Medelåldern för försökspersonerna var 38,4 år. L*-värdena för varje appliceringsställe före applicering av testartikeln visas i tabell-la. L*-värdena analyserades på varje testställe innan testartikeln applicerades och bekräftade att det inte fanns någon skillnad i hudton mellan platserna innan testet startade.
ΔL-värdena för varje testställe innan testartikeln applicerades och 7 dagar efter applicering visas i figuren nedan. ΔL för appliceringsstället med 1 procent 4MSK kräm var statistiskt signifikant mindre än ΔL för appliceringsstället med baskrämen. Dessutom blev ΔL gradvis mindre med ökande 4MSK-innehåll, vilket drog slutsatsen att 4MSK har en dosberoende antipigmenteringseffekt. Dessutom observerades inga hudavvikelser såsom svullnad, rodnad eller kliande cancer under testperioden.

2.5. Förbättrar obalansen av keratinocytproliferation och differentiering och främjar smidig frisättning av melanin
Studier på melanocyter har visat signifikant hämning av melanogenes vid en koncentration av 3 x 10-4 mol/L, med full potential jämfört med befintliga vitare aktiva ingredienser. Studier av verkningsmekanismen för hämning av melaninproduktion, och om enzymet kuraminidasaktivitet, som är nödvändigt för melaninproduktion, hindras, har visat att 4MSK inte bara hämmar melaninproduktionen, utan även har effekten att hindra kuraminidasaktivitet.
Det är känt att den främsta orsaken till pigmentering är UV-ljus, vilket orsakar en övergående abnormitet i uttrycket av differentieringsmarkörer i keratinbildande celler. Baserat på våra fynd att obalansen i differentieringsmarkören är kronisk även utan UV-bestrålning vid pigmenteringsplatsen, genomförde vi en studie om normaliseringen av differentieringsmarkören av 4MSK. Med hjälp av en tredimensionell hudmodell har vi visat att 4MSK har en defensiv effekt mot obalanserat uttryck av tropomyosin, en markör för keratinocytdifferentiering, på både mRNA- och proteinnivåer.

För det andra har in vivo-tester bekräftat att testprodukten som innehåller 15 procent 4MSK har en koncentrationsberoende försvarseffekt mot UV-pigmentering. Inga hudavvikelser observerades under hela testperioden på grund av användningen av testprodukten innehållande 4MSK, vilket gör 4MSK säker och effektiv som kosmetisk ingrediens.
In vitro-studier har bekräftat den direkta hämmande effekten av 4MSK på melanogenes och dess effekt på proliferation och differentiering av keratinbildande celler. Båda dessa åtgärder har en defensiv effekt på produktionen och frisättningen av melanin, vilket orsakar överskott av melaninavlagringar i huden. In vivo-tester har visat att 4MSK är ett utmärkt försvar mot UV-pigmentering och man tror därför att 4MSK även är effektivt mot pigmentering, fräknar och matthet i form av överskott av hudmelanin.

3. Ansökningar

Kalium 4-metoxisalicylat används främst i kosmetiska produkter.

4. Flödesschema

2,4-Dihydroxibensoesyra → tillsätt natriumhydroxid alkalisk vattenlösning → lös → kyla ner → → justera PH → fällning → centrifug → skölj → torr → rå 4-metoxisalicylsyra → värme → rör om → extraktfilter → torr → ren 4-metoxisalicylsyra → justera PH → rör om 3 → återvinn lösningsmedel → kyl ner kristallisation → extraktfilter → rå 4-metoxisalicylsyra kalium → lös upp rå → avfärga → extrahera filter → kyl ner kristallisation → vakuum torr → ren 4-metoxisalicylsyra kalium

5. Kvalitetsstandard

Enligt Enterprise Standard

Föremål	Specifikationer	Resultat
Utseende	Vitt till benvitt pulver	vitt pulver
Identifiering	HPLC, NMR, LC-MS	Överensstämmer med standard
Tungmetaller	Mindre än eller lika med 20 ppm	<20ppm
Som	Mindre än eller lika med 2 ppm	<2ppm
Förlust vid torkning	Mindre än eller lika med 0,5 procent	0.29 procent
Enkel förorening	Mindre än eller lika med 1,0 procent	Följer
Analys (HPLC)	Större än eller lika med 98,0 procent	98,56 procent